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實驗步驟
1.獲取樣本,培養細胞,
2.調整細胞懸液密度為1x103個/ml細胞。
3.制備底層瓊脂,溶化的5%瓊脂和 37℃ 左右預溫的新鮮培養液以1:9比例在 40℃均勻混合,加入培養血(直徑 60mm )中,每皿含0.5%瓊脂培養基2ml,室溫下瓊脂凝固。
4.制備上層瓊脂37℃密度每川含200個的細胞暴液15ml移入小燒杯中,加入 40℃,5%瓊脂等體積混勻,即成025%半盾體瓊脂培養其,配好的半固體瓊脂培養其立即加入鋪有底層瓊脂的培養川中,室溫下瓊脂釋固。 37℃、5%CO2靜詈培養2-3周。
5.當培養川中出現肉眼可見克降時,終止培養,棄去培養液,PBS液小心浸洗2次,空氣干燥,電酶固定15分鐘,車用醇后空氣干燥,用Giemsa染液染色10分鐘,流水緩惕洗去染液,空氣干燥。
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