平板克隆形成技術服務

簡要描述：平板克隆形成技術服務
當單個細胞在體外增殖6代以上，其后代所組成的細胞群體，稱為集落或克隆。每個克隆含有50以上的細胞，大小在0.3-1.0mm之間。集落形成率表示細胞的獨立生存能力，各種理化因素可能導致細胞的克隆形成能力發生改變，通過計數克隆形成率可對單個細胞的增殖潛力做定量分析，了解細胞的增殖能力和獨立生存能力。

更新時間：2026-03-20
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平板克隆形成技術服務基本步驟:

1.取對數生的各組細胞，分別用0.25%****消化并吹打成單個細胞并把細胞縣浮在10%胎生血清的DMEM培養液中衡用。

2.將細胞具酒作梯度倍數稀釋，每組細胞分別以每川50、100，200個細胞的梯度密度分別接種合10mL 37"C預溫培養液的皿中，并輕輕轉動，使細胞分散均勻。置37C、5%COz及飽和溫度的細胞培養箱中培養2-3周。

3.經常觀察，當培養皿中出現肉眼可見的克隆時，終止培養。棄去上清液，用PBS小心浸洗2次。加甲醛固定細胞5ml固定15分鐘。然后安固定液加適量GIMSA應用染色液染10-30分鐘然后用流水緩慢洗去染色源，空氣干燥。

4.將平皿倒置并疊加一張帶網格的適明膠片，用肉眼直接計數克隆或在顯微鏡(低倍鏡)計數大于10個細胞的克隆數，再計算克隆形成率，克隆形成率=克隆數/接種細胞數。

平板克隆形成技術服務流程:

1)項目方案的確定，包括目的細胞、細胞處理方式及處理時間等;

2)細胞培養;

3)克隆形成實驗;

4)克隆形成實驗圖片及實驗報告。

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