
簡要描述:細胞劃痕實驗服務原理:將細胞培養(yǎng),觀察細胞向無細胞的劃痕區(qū)域遷移情況,來判斷細胞的遷移能力。
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實驗流程
1.先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著,均勻得劃橫線,大約每隔0.5~1cm一道,橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。
2.在空中加入約5X105個細胞,具體數(shù)量因細胞不同而不同,掌握為過夜能鋪滿。
3.第二天用槍頭比著直尺,盡量垂至于背后的橫線劃痕,槍頭要垂直,不能傾斜,
4.用PBS洗細胞3次,去處劃下的細胞,加入無血清培養(yǎng)基。
5.放入37度5%CO2培養(yǎng)箱,培養(yǎng)。按0,6,12,24小時取樣,拍照。
細胞接種到孔板,培養(yǎng)至鋪滿單層
用槍頭(10 μL/200 μL)筆直劃一橫線
PBS 洗去脫落細胞,加入含藥 / 對照培養(yǎng)基
0 h、24 h、48 h 拍照同一位置
ImageJ 計算傷口愈合率
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