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流式雙標實驗

簡要描述:流式雙標實驗是伊萊博生物細胞平臺較為成熟的實驗技術服務之一,由本公司經驗豐富的實驗人員操作完成。

  • 更新時間:2026-03-20
  • 廠商性質:代理商
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流式雙標實驗伊萊博生物細胞平臺較為成熟的實驗技術服務之一,由本公司經驗豐富實驗人員操作完成。

一、什么是流式雙標

同時檢測2 個表面抗原,用來區分細胞亞群
常用組合舉例:
  • CD3/CD4 → 總 T 細胞、CD4+T

  • CD3/CD8 → 總 T 細胞、CD8+T

  • CD4/CD25 → Treg

  • F4/80/CD11b → 巨噬細胞

  • CD11c/MHC-II → 樹突狀細胞

  • IL-4/IFN-γ → Th1/Th2(胞內染色)


二、實驗材料

  • 單細胞懸液(脾細胞、PBMC、BALF、組織消化)

  • 流式抗體:FITC/PE/APC/PerCP 任意兩種不同熒光

  • 流式染色緩沖液(PBS+1% FBS/BSA)

  • 紅細胞裂解液(血 / 脾樣本必需)

  • 96 孔 U 型板 / 流式管

  • 流式細胞儀


三、標準操作步驟(表面雙標)

1. 細胞制備

  1. 組織研磨 → 200 目濾網過濾

  2. 離心 1200 rpm × 5 min

  3. 加紅細胞裂解液,室溫裂解 5 min

  4. 終止裂解,洗滌 2 次

  5. 調整細胞濃度:1×10? / 管

2. 封閉 Fc 受體(關鍵,減少非特異)

  • 加 CD16/32 封閉抗體

  • 4℃ 10 min

3. 雙熒光抗體染色

  • 每管加入 兩種熒光抗體(按說明書體積)

  • 輕輕混勻,4℃避光孵育 20 min

4. 洗滌

  • 加染色緩沖液,離心棄上清

  • 重復 1~2 次

5. 重懸上機

  • 200~400 μL 重懸,上機檢測






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