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免疫共沉淀實驗服務

簡要描述：免疫共沉淀實驗服務:是一種利用抗原抗體相互作用的免疫學原理來研究蛋白質相互作用的經典實驗方法，它可以確定兩種蛋白在完整細胞內生理條件下是否存在相互作用。

  • 更新時間：2026-03-20
  • 廠商性質：代理商
  • 訪  問  量：2107

詳細介紹

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一、原理

用目標蛋白的抗體把蛋白從細胞裂解液里 “拉下來"，
如果另一個蛋白和它在體內結合，就會被一起沉淀下來，
用 Western blot 檢測是否存在，證明兩者相互作用。

二、核心用途

  • 證明兩個蛋白直接 / 間接結合

  • 驗證信號通路中蛋白復合物形成

  • 驗證藥物是否破壞蛋白相互作用

  • 檢測轉錄因子與伴侶蛋白結合

三、標準實驗流程（通用版）

  1. 細胞裂解
    用溫和非變性裂解液（含蛋白酶抑制劑、磷酸酶抑制劑）
    冰上裂解 30 min，離心取上清
  2. 預清除
    加入 Protein A/G 磁珠 / 瓊脂糖珠
    4℃輕搖 1 h，減少非特異性吸附
  3. 免疫沉淀（IP）
    加入目標蛋白一抗（或 IgG 陰性對照）
    4℃ 輕搖過夜孵育
  4. 結合磁珠
    加入 Protein A/G 磁珠
    4℃ 輕搖 2–4 h
  5. 洗滌
    洗滌液洗 3–4 次，去除雜蛋白
  6. 洗脫與 Western blot
    上樣緩沖液煮沸洗脫
    跑膠 → 轉膜 → 孵育另一個蛋白的抗體檢測

四、結果怎么看

  • IgG 對照組無條帶

  • IP 組出現目的條帶 → 兩蛋白存在相互作用

  • 給藥后條帶變淺 → 藥物抑制結合


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