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貼壁 / 懸浮細胞的形態學觀察
細胞蛋白表達定位 / 定量（免疫組化）
細胞凋亡 / 增殖檢測
細胞纖維化 / 脂質沉積特殊染色
細胞基因表達（原位雜交）
懸浮細胞：離心（1000–1500 rpm，5 min），棄上清，PBS 重懸，再離心，重復 2 次
貼壁細胞：yi酶消化（0.25% yi酶 - EDTA），終止消化，離心收集，PBS 洗 2 次
終：細胞沉淀≥5×10?個（太少易丟失、切片無細胞）
細胞沉淀加4% 多聚甲醛（體積≥沉淀 10 倍），室溫固定 30–60 min
離心棄固定液，PBS 洗 2 次（每次 5 min）
固定后細胞加少量 PBS 重懸，轉移至1.5 mL EP 管
再次離心（1500 rpm，5 min），棄上清，保留致密細胞沉淀（約 1–2 mm3）
可選：加1% 瓊脂糖（45℃預熱）包裹細胞團，冷卻凝固，便于后續操作
70% 乙醇 → 30 min
80% 乙醇 → 30 min
90% 乙醇 → 30 min
95% 乙醇 → 20 min × 2
100% 乙醇 → 20 min × 2
二甲苯 Ⅰ → 15 min
二甲苯 Ⅱ → 15 min
二甲苯：石蠟（1:1）混合液（56–58℃）→ 30 min
石蠟 Ⅰ（56–58℃）→ 60 min
石蠟 Ⅱ（56–58℃）→ 60 min
包埋模具預熱，倒入熔蠟（底層 1–2 mm），稍冷卻
用鑷子將細胞團切面朝下置于模具中央
補滿熔蠟，冷卻臺凝固 15–30 min，脫模、修整蠟塊
輪轉切片機切4 μm連續切片
45℃水浴展片，防脫載玻片撈片，60℃烤片 2–4 h
后續：脫蠟→染色（HE/Masson/IHC）→封片
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