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| 品牌 | 其他品牌 | 產地類別 | 國產 |
|---|---|---|---|
| 應用領域 | 醫療衛生,生物產業 |
chip蛋白實驗技術服務
作為自然科學的重要分支,生物整體科研涵蓋基礎生物研究與應用生物研究兩大板塊,核心使命是揭示生命本質、調控生命活動、改造自然,其研究成果廣泛滲透到醫學、農業、環保、能源等多個領域,尤其在醫學領域,為疾病機制研究、新型診療技術研發、藥物創新等提供了堅實的理論基礎和技術支撐,是連接基礎生物研究與臨床醫療實踐的關鍵橋梁。
1 、樣品準備與交聯
細胞收集后,用37%的formaldehyde處理細胞,交聯核酸與DNA結合蛋白;
2. 超聲打斷染色質
裂解細胞,用Bioruptor將染色質超聲破碎成200-1000bp片斷;將片段分為兩份,一份用于免疫共沉淀,一份用于對照。
3 、免疫共沉淀 (IP)
取B步驟所得一份片斷與ChIP特異抗體結合進行免疫共沉淀,利用免疫磁珠法富集抗體復合物。
4 、解交聯及純化 DNA
將富集的DNA/蛋白復合物解交聯釋放DNA的片段,并進行純化(IP DNA);B步驟所得用于對照(Input DNA)的片斷作不進行IP實驗,但也要解交聯并純化。
5 、 DNA 段 PCR 擴增
針對ChIP DNA, Input DNA及對照DNA的目的片段設計特異性引物并進行熒光定量PCR擴增。
6 、結果分析
%Input=2(CtInput-CtChIP)×Fd×
Fold Enrichment = [%(ChIP/Input)] / [%( Negative control/Input)]
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