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磁珠分選細胞實驗

簡要描述:MACS分選是基于細胞表面抗原能與連接有磁珠的特異性單抗相結合,在外加磁場中通過抗體與磁珠相連的細胞被吸附而滯留在分選柱內,而無該種表面抗原的細胞由于不能與連接有磁珠的特異性單抗相結合而沒有磁性,不在分選柱內停留,進而使細胞得以分離。分為有柱式分選和無柱式分選。

  • 更新時間:2026-03-20
  • 廠商性質:代理商
  • 訪  問  量:1318

詳細介紹

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1)有柱式分選-陽性分選(磁珠標記的細胞為目的細胞)

①  磁珠標記:樣品與磁珠孵育15min左右;

②  陰性組分先行流出:孵育后的樣品過柱處理,標記磁珠的細胞在磁場的作用下吸附到MACS分選柱子上,沒有被標記的細胞(陰性組分)先行流到試管中;

洗脫陽性組分:把MACS分選柱子從磁分選器上拿下來,這時磁珠是沒有磁力的,故洗脫獲得陽性組分,收集后用于做后續實驗。


一、基本原理

  • 特異性抗體標記磁珠結合目標細胞

  • 通過磁場分離:標記細胞被吸附在管壁,未標記細胞流出

  • 兩種策略:

    1. 陽性分選:直接選目標細胞(純度高)

    2. 陰性分選:去除雜細胞,保留目標(活性更好)


二、常用樣本類型

  • 小鼠脾臟、淋巴結、胸腺

  • 外周血(PBMC)

  • 骨髓

  • 肺 / 腦 / 腫瘤組織單細胞懸液


三、標準實驗步驟(通用版)

1. 制備單細胞懸液

  • 組zhi剪碎 → 研磨 / 濾網過濾 → 離心

  • 紅細胞裂解(脾臟 / 血樣本必須)

  • 重懸于分選緩沖液(PBS+0.5%BSA+2mMEDTA)

  • 計數,調整細胞濃度

2. 磁珠標記

  • 取 10? 細胞,離心棄上清

  • 加入磁珠抗體,4℃ 避光孵育 15–20 min

  • 每 1–2 mL 緩沖液洗滌,離心去未結合磁珠

3. 磁場分選

  • 細胞重懸后加入分選柱 / 分選管

  • 置于磁力架

  • 收集流出液(陰性組分)

  • 移出磁力架,用緩沖液沖洗,收集洗脫液(陽性組分)

4. 質控與后續實驗

  • 流式細胞術檢測純度

  • 臺盼藍測活率

  • 可直接用于:培養、刺激、WB、qPCR、測序等



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