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pcr實驗技術服務

簡要描述:PCR技術是模擬體內DNA的天然復制過程,在體外擴增DNA分子的一種分子生物學技術,主要用于擴增位于兩段已知序列之間的DNA區段。在待擴增的DNA片段兩側和與其兩側互補的兩個寡核苷酸引物,經變性、復性和延伸若干個循環后,DNA擴增2?倍。

  • 更新時間:2026-03-20
  • 廠商性質:代理商
  • 訪  問  量:915

詳細介紹

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科研實驗服務

1. 基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析

2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選

7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR

8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建

一、實驗總流程

  1. 提取總 RNA(組織 / 細胞)

  2. 測濃度 & 純度(Nanodrop)

  3. 反轉錄(cDNA 合成)

  4. qPCR 擴增

  5. 數據分析(2^-ΔΔCt 法)


二、RNA 提取(關鍵一步)

  1. 細胞 / 組織加入 Trizol,充分裂解

  2. 加氯仿,混勻,離心取上層水相

  3. 加異丙醇沉淀 RNA,離心棄上清

  4. 75% 乙醇洗滌,晾干

  5. 無酶水溶解

  6. 檢測:

    • A260/280:1.8–2.1 合格

    • 無基因組污染


三、反轉錄(RT)

相同質量 RNA(如 1 μg)
加反轉錄試劑盒體系:
  • RNA

  • 5×Buffer

  • dNTP

  • 隨機引物 / Oligo dT

  • 反轉錄酶

  • 無酶水

條件:
  • 37℃ 15 min

  • 85℃ 5 s 滅活酶

    得到 cDNA,-20℃保存。



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