中耳炎動(dòng)物模型脂多糖誘導(dǎo)

從細(xì)菌學(xué)及組織學(xué)檢查的結(jié)果以及臨床征象的研究表明，SOM可能是中耳的一種輕型的或低毒性的細(xì)菌感染，而細(xì)菌分解產(chǎn)物——內(nèi)毒素在SOM的發(fā)病機(jī)制中起一定的作用。它是細(xì)菌死亡時(shí)以一種生物活性的形式釋放出來(lái)的一種物質(zhì)，主要成分為脂多糖（LPS），能引起中耳黏膜結(jié)締組織增生，細(xì)胞密度增大，毛細(xì)血管的通透性增高，腺體及杯狀細(xì)胞增生，分泌增加，并破壞正常的黏膜轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)，促進(jìn)中耳積液的蓄積，導(dǎo)致SOM的發(fā)生。

其還可以激活補(bǔ)體，使嗜堿性粒細(xì)胞或肥大細(xì)胞釋放組織胺、5-羥色胺等血管活性介質(zhì)及趨化因子，導(dǎo)致血管擴(kuò)張，毛細(xì)血管通透性增加，白細(xì)胞向炎癥病灶部位聚集，促進(jìn)吞噬。在發(fā)揮吞噬作用的過(guò)程中，釋放溶酶體酶等生物活性物質(zhì)，破壞致病菌的同時(shí)也可損傷鄰近組織，加劇炎癥損傷組織細(xì)胞，導(dǎo)致SOM。因此，LPS被應(yīng)用于建立SOM動(dòng)物模型中。

中耳炎動(dòng)物模型造模方法：

本模型采用手術(shù)暴露聽(tīng)泡，每側(cè)聽(tīng)泡內(nèi)注射脂多糖，誘導(dǎo)大鼠中耳炎形成法。

動(dòng)物的選擇：6-8周齡，200-300g左右的健康SD大鼠（手術(shù)xian微鏡下查看，無(wú)中耳疾病），性別不限

制備周期：3天，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整

制備方法：正常對(duì)照組正常飼養(yǎng)一周，不做任何干預(yù)處理。SD大鼠麻醉后，手術(shù)暴露聽(tīng)泡，在無(wú)菌條件下用50ul微量注射器每側(cè)聽(tīng)泡內(nèi)注射1mg/ml脂多糖一次，注射量40ul，于注射48小時(shí)后處死取樣。對(duì)照組大鼠注射40ul的生理鹽水溶液。

通過(guò)病理HE染色分析判斷模型：由HE染色結(jié)果圖可知，模型組聽(tīng)泡黏膜明顯增厚，部分黏膜上皮纖毛排列紊亂，黏膜組織腫脹，可見(jiàn)較多炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。

脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的SOM模型具有與臨床上SOM患者相似的癥狀。這個(gè)造模的方法既強(qiáng)調(diào)了感染性因素在SOM的核心作用，也注意到咽鼓管堵塞的重要作用。

該方法也有一些缺點(diǎn)：出現(xiàn)中耳滲液的幾率也不是很高，而且持續(xù)的時(shí)間短。使用聽(tīng)泡內(nèi)先注入纖維蛋白封閉劑(fibrin sealant)再注入LPS的方法提高單純聽(tīng)泡內(nèi)注入LPS的方法的成功率，SOM病程也隨之延長(zhǎng)。