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transwell轉移實驗服務

簡要描述:原理:常用8.0um,12.0um膜,上室種腫瘤細胞,下室加入FBS或某些特定的趨化因子,腫瘤細胞會向營養成分高的下室跑,計數進入下室的細胞量可反映腫瘤細胞的遷移能力。

  • 更新時間:2026-03-20
  • 廠商性質:代理商
  • 訪  問  量:1372

詳細介紹

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一、基本原理

  • Transwell 小室:上層 + 下層,中間有多孔濾膜(8 μm 常用)

  • 遷移實驗(Migration):細胞主動穿過膜孔,從上層到下層

  • 侵襲實驗(Invasion):膜上包被Matrigel,模擬細胞穿過基底膜

  • 染色后計數穿膜細胞,反映轉移能力


二、核心材料

  • Transwell 小室(24 孔板,8 μm 孔徑)

  • Matrigel(僅侵襲實驗用)

  • 無血清培養基

  • 含血清培養基(下室趨化)

  • 甲醇 / 多聚甲醛固定

  • 結晶紫染色


三、實驗步驟(通用標準流程)

1. 鋪膠(僅侵襲實驗)

  • Matrigel 用無血清培養基1:8 稀釋

  • 每孔上層加 50 μL

  • 37℃ 孵育 2–4 h 或過夜 使其凝固

2. 細胞處理

  • 胰mei消化,無血清培養基重懸

  • 計數,調整濃度:1×10? 細胞 / 孔 左右

3. 加樣

  • 上室:200 μL 細胞懸液(無血清)

  • 下室:600 μL 含 10% FBS 培養基(趨化)

4. 培養

  • 37℃ 培養

    • 遷移:12–24 h

    • 侵襲:24–48 h

5. 固定與染色

  • 取出小室,PBS 輕洗

  • 甲醇固定 15 min

  • 0.1% 結晶紫染色 15–20 min

  • 棉簽輕輕擦掉上室未穿膜細胞

6. 拍照計數

  • 隨機取 5 個視野(×100 或 ×200)

  • ImageJ 計數細胞數,計算平均值


四、結果判斷

  • 穿膜細胞越多 → 遷移 / 侵襲能力越強

  • 給藥組 vs 模型組:細胞數顯著減少 → 抑制轉移


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