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Transwell 小室:上層 + 下層,中間有多孔濾膜(8 μm 常用)
遷移實驗(Migration):細胞主動穿過膜孔,從上層到下層
侵襲實驗(Invasion):膜上包被Matrigel,模擬細胞穿過基底膜
染色后計數穿膜細胞,反映轉移能力
Transwell 小室(24 孔板,8 μm 孔徑)
Matrigel(僅侵襲實驗用)
無血清培養基
含血清培養基(下室趨化)
甲醇 / 多聚甲醛固定
結晶紫染色
Matrigel 用無血清培養基1:8 稀釋
每孔上層加 50 μL
37℃ 孵育 2–4 h 或過夜 使其凝固
胰mei消化,無血清培養基重懸
計數,調整濃度:1×10? 細胞 / 孔 左右
上室:200 μL 細胞懸液(無血清)
下室:600 μL 含 10% FBS 培養基(趨化)
37℃ 培養
遷移:12–24 h
侵襲:24–48 h
取出小室,PBS 輕洗
甲醇固定 15 min
0.1% 結晶紫染色 15–20 min
棉簽輕輕擦掉上室未穿膜細胞
隨機取 5 個視野(×100 或 ×200)
ImageJ 計數細胞數,計算平均值
穿膜細胞越多 → 遷移 / 侵襲能力越強
給藥組 vs 模型組:細胞數顯著減少 → 抑制轉移
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