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軟瓊脂克隆形成服務(wù)

簡要描述：軟瓊脂克隆形成服務(wù):克隆形成率反映細胞群體依賴性和增殖能力兩個重要性狀。

更新時間：2026-03-20
廠商性質(zhì)：代理商
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實驗技術(shù)服務(wù)

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一、原理

兩層瓊脂體系：

底層瓊脂：起支撐作用
上層瓊脂：細胞懸浮其中，無法貼壁
只有惡性程度高 / 腫瘤干細胞樣的細胞能在懸浮狀態(tài)下增殖形成肉眼可見的克隆。

二、材料

2× 培養(yǎng)基（含 20% FBS）
1.2% 低熔點瓊脂糖（底層）
0.7% 低熔點瓊脂糖（上層）
6 孔板

三、標準步驟（常用體系）

1. 鋪底層膠

1.2% 瓊脂: 2× 培養(yǎng)基 = 1:1混合（終濃度 0.6%）
每孔加 2 mL，室溫凝固

2. 鋪上層膠（含細胞）

0.7% 瓊脂: 2× 培養(yǎng)基 = 1:1混合（終濃度 0.35%）
加入細胞懸液，混勻
細胞密度：1×103~1×10? / 孔
每孔加 1~1.5 mL，室溫凝固

3. 培養(yǎng)

37℃、5% CO? 培養(yǎng) 14~21 天
每 3～4 天滴加少量培養(yǎng)基保濕

4. 染色與計數(shù)

PBS 輕洗
結(jié)晶紫或 MTT 染色
顯微鏡下計數(shù)直徑＞50~100 μm的克隆數(shù)

四、結(jié)果判斷

克隆數(shù)越多、體積越大 → 惡性程度 / 成瘤能力越強
給藥組克隆數(shù)減少 → 抑制惡性表型

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軟瓊脂克隆形成服務(wù)

一、原理

二、材料

三、標準步驟（常用體系）

1. 鋪底層膠

2. 鋪上層膠（含細胞）

3. 培養(yǎng)

4. 染色與計數(shù)

四、結(jié)果判斷

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