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堿性磷酸酶染色檢測技術

簡要描述:堿性磷酸酶染色檢測技術原理:
在一定條件下,使細胞中的酶作用于酶的底物,使其產物在原地進行 捕捉、沉淀轉化為有色產物,細胞組織中的堿性磷酸酶在堿性(PH9.0-9.6)環境下使作用液中的底物(a-磷酸萘酚鈉)水解,產生出a萘酚,然后再與 偶氨鹽偶聯,生成不溶性的耐曬染料

  • 更新時間:2026-03-21
  • 廠商性質:代理商
  • 訪  問  量:1034

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實驗操作流程:

1、取材、 固定、包埋、切片;

2、取已粘好烘 干的切片兩塊,放入二甲苯(一)→二甲苯(二)(各3-4分鐘)的染缸中進行脫蠟,再經100%乙醇(一)

→100%<醇(二)→95%乙醇→90%乙醇 →70%醇→30%乙醇→水。每級各一分鐘,在移切片時,用鑷子夾住切片震蕩

并提起,放下反復幾次,在移入下一染缸邊緣前稍停留,讓溶液滴凈后,再入下 一染缸,以免把上一染缸溶液過多帶入下

一染缸,而影響切片質量;

3、將其中一塊切片以蠟筆作一標記(用作對照組切片),放入沸水中煮沸5分鐘;

4、將兩塊切片均放入AKP作用液中孵育30-60分鐘,作用液要事先預熱到37℃,水浴中進行;

5、取出切片在蒸餾水中洗滌;

6、放入硝.酸.鈷溶液2-3分鐘;

7、蒸餾水沖洗干凈,否則切片易被污染,影響定位;

8、切片浸入硫化銨中2-3分鐘;

9、蒸餾水沖洗干凈;

10、經各級酒精脫水。即30%乙醇→70%乙醇→90%乙醇→950%乙醇→100%乙醇(二)→100%乙醇(一),各級一分鐘。





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