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β-半乳糖苷酶染色技術服務

簡要描述:β-半乳糖苷酶是一種常用的報告基因分子,通過原位染色,在普通的光學顯微鏡下就可以用于檢測到β-半乳糖苷酶的表達。

  • 更新時間:2026-03-21
  • 廠商性質:代理商
  • 訪  問  量:1151

詳細介紹

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實驗步驟:

1.用 2 mL D-PBSA液洗滌細胞。

2.用 1 mL 固定液于室溫下固定細胞 5 min。

3.用 2 mL D-PBSA洗滌細胞 2次。

4.將1mL 底物/染色液加入到每個培養子內 ,37℃孵音2h.

5.用 2 mL D-PBSA液沖洗每孔細胞,在倒置顯微鏡下觀察細胞,計數藍染( β-gal 陽性)細胞。

6.培養板的儲存。在每孔加 1 mL 含 10%甲醛的緩沖鹽溶液,室溫下固定 10 min,然后用緩沖鹽溶液洗滌細胞,4℃ 儲存緩沖鹽溶液。

一、原理

衰老細胞特異性表達溶酶體 β- 半乳糖苷酶,在 pH6 條件下可催化底物 X?Gal 生成藍綠色沉淀,以此標記衰老細胞。

二、染色結果

  • 衰老細胞:胞質呈藍綠色 / 深藍色

  • 正常細胞:基本不著色

三、適用樣本

  • 細胞爬片

  • 組織冰凍切片(少數情況)

四、簡要步驟

  1. PBS 洗滌

  2. 固定液固定 10–15 min

  3. PBS 洗凈

  4. 加入染色工作液(含 X-Gal)

  5. 37℃ 恒溫孵育過夜(12–16 h)

  6. PBS 洗滌,顯微鏡觀察拍照




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