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分子基礎：WGA 為 36 kDa 左右的植物凝集素，有雙糖結合位點；未透化時主要標記細胞膜外糖基，透化后可標記高爾基體等細胞內糖基化結構；琥珀酰化 WGA 可增強對 β-GlcNAc 的選擇性。
熒光 WGA 染色（常用）：直接偶聯 FITC、Alexa Fluor 系列，熒光顯微鏡 / 共聚焦觀察，適合活細胞、快速定位；
酶標 WGA 染色：偶聯 HRP/AP，DAB/BCIP-NBT 顯色，普通光鏡可見、可保存；
生wu素化 WGA + 鏈霉親和素系統：信號放大，適合低表達樣本。
樣本準備
活細胞：PBS 輕洗，勿透化；
石蠟切片：脫蠟→水化→3% H?O?阻斷內源性酶；
冰凍切片：固定（4% 多聚甲醛）后 PBS 洗。
封閉與孵育：1% BSA 封閉 15–30 分鐘；熒光 WGA 工作液（5 μg/mL 左右，PBS 配制）室溫避光 10–20 分鐘（活細胞 37℃）；
洗滌：PBS 3 次 ×5 分鐘，徹di去除未結合 WGA；
復染與封片：DAPI 染核，抗淬滅封片劑封片；酶法需加底物顯色后脫水透明封片。
透化禁忌：純細胞膜標記嚴禁先透化（Triton X-100 會讓 WGA 進入胞內）；需同時染核 / 胞內蛋白時，優先染 WGA 再短暫低濃度透化；
濃度與時間：過高濃度或過長孵育會導致非特異背景；建議做 1、5、10 μg/mL 濃度梯度；
對照：設置同型糖（0.2 M GlcNAc）競爭抑制對照，驗證特異性；
毒性：活細胞染色后及時洗滌，避免 WGA 長時間作用影響細胞活力。
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