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免疫組化染色技術服務

簡要描述：免疫組化概述：免疫組化，也稱免疫組織化學技術或免疫細胞化學技術。是指應用免疫學基本原理即抗原與抗體特異性結合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑顯色來確定組織細胞內抗原，對其進行定位、定性及相對定量的研究。

  • 更新時間：2026-03-21
  • 廠商性質：代理商
  • 訪  問  量：1262

詳細介紹

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一、試劑與耗材

  • 石蠟切片

  • 二甲苯、梯度乙醇

  • 3% H?O?

  • 抗原修復液（檸檬酸鹽緩沖液 pH6.0 常用）

  • PBS

  • 一抗、二抗（HRP 標記）

  • DAB 顯色液

  • 蘇木素、返藍液

  • 中性樹膠封片劑

二、完整步驟

  1. 脫蠟至水
    二甲苯 Ⅰ、Ⅱ 各 10min → 100%、95%、85%、75% 乙醇各 5min → 水洗。
  2. 滅活內源性過氧化物酶
    3% H?O? 室溫 10–15min → PBS 洗 3 次 ×3min。
  3. 抗原修復（關鍵）
    檸檬酸鹽緩沖液微波 / 水浴煮沸 10–15min，自然冷卻至室溫 → PBS 洗 3 次 ×3min。
  4. 封閉
    5%–10% 正常山羊 / 兔血清（根據二抗來源）室溫 20min，甩干，不洗。
  5. 一抗孵育
    滴加一抗，4℃過夜 或 37℃ 1h → PBS 洗 3 次 ×5min。
  6. 二抗孵育
    滴加 HRP 標記二抗，37℃ 20–30min → PBS 洗 3 次 ×5min。
  7. DAB 顯色
    新鮮配制 DAB，鏡下控制顯色（1–5min），出現棕黃色即可終止 → 流水沖洗。
  8. 蘇木素復染
    蘇木素染核 1–3min → 水洗 → 1% 鹽酸酒精分化 → 流水返藍。
  9. 脫水透明封片
    75%→85%→95%→100% 乙醇各 2min → 二甲苯透明 → 中性樹膠封片。

三、結果判斷

  • 陽性：目標部位出現棕黃色顆粒

  • 細胞核：藍色

  • 背景應干凈，無非特異性染色


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