全國服務咨詢熱線：
15221734409
15221734409
相關文章
Related Articles詳細介紹
| 品牌 | 其他品牌 | 應用領域 | 醫療衛生,生物產業 |
|---|
通過機械劃痕在單層腫瘤細胞上制造無細胞區域，觀察邊緣細胞向區遷移的能力，模擬體內腫瘤轉移過程
。
?細胞鋪板?
使用6孔板，接種密度為5×10?個細胞/孔（具體依細胞類型調整），過夜培養至90%融合度
。
鋪板后輕拍培養板兩側（非四邊）使細胞分布均勻
。
?劃痕制作?
用滅菌200μL槍頭或牙簽垂直接觸板底，勻速劃出直線（可借助直尺對齊）
。
每孔劃1-3道，劃痕寬度建議500μm（Culture Insert法可標準化寬度）
。
?清洗與培養?
PBS輕柔沖洗3次去除脫落細胞，換用含1-2% FBS的培養基抑制增殖干擾
。
加入絲烈霉素（4μg/mL）可進一步阻斷增殖，純化遷移效應
。
?圖像采集與分析?
?時間點?：0h、12h、24h（依細胞遷移速度調整）
。
?定位標記?：提前用Marker筆在板底畫網格線確保同一視野
。
?量化方法?：
遷移率 = (初始寬度 - 終點寬度) / 初始寬度 ×100%。
?細胞狀態?
選擇高活力（>95%）且低自發凋亡的腫瘤細胞系
。
避免過度消化，吹打時使用含血清培養基終止反應
。
?劃痕一致性?
槍頭需垂直板底，壓力均勻，多孔實驗建議同一人操作
。
預實驗確定劃痕寬度（過窄易愈合，過寬難遷移）
。
?干擾控制?
排除增殖影響：低血清培養基或絲裂烈素處理
。
溫度穩定：操作全程在37℃恒溫臺進行，減少熱應激
產品咨詢
電話
微信掃一掃
地址：上海市寶山區長江南路180號B區650室
郵箱：yilaibo@shyilaibo.com